Le glyphosate est efficace pour tuer une grande variété de plantes, y compris les graminées et les plantes à feuilles larges et ligneuses. En 2007, le glyphosate était l'herbicide le plus utilisé dans le secteur agricole des États-Unis, avec un poids de 180 à 185 millions de livres (de 82 000 à 84 000 tonnes), le deuxième le plus utilisé à la maison. et jardin avec 5 à 8 millions de livres (2 300 à 3 600 tonnes) et le gouvernement a appliqué de 5 à 6 800 tonnes dans l'industrie et le commerce. Il est couramment utilisé pour l'agriculture, l'horticulture, la viticulture et la sylviculture, ainsi comme entretien de jardin (y compris l'usage domestique). il a un effet relativement faible sur certaines espèces de trèfle et la gloire du matin.

Le glyphosate et les herbicides connexes sont souvent utilisés pour l'éradication des espèces envahissantes et la restauration de l'habitat, en particulier pour améliorer l'établissement des plantes indigènes dans les écosystèmes des Prairies. l'application contrôlée est généralement combinée avec un herbicide sélectif et des méthodes traditionnelles d'éradication des mauvaises herbes telles que le paillage pour obtenir un effet optimal.

Dans de nombreuses villes, le glyphosate est pulvérisé le long des trottoirs et des rues, ainsi que dans les crevasses entre les trottoirs où poussent souvent les mauvaises herbes. Cependant, jusqu'à 24% du glyphosate appliqué sur des surfaces dures peut être évacué par l'eau. La contamination par le phlycphosate de l'eau de surface est attribuée à l'utilisation urbaine et agricole. Le glyphosate est utilisé pour déblayer les voies ferrées et éliminer la végétation aquatique indésirable. depuis 1994, le glyphosate a été utilisé pour la pulvérisation aérienne en colombie dans le cadre de programmes d'éradication de la coca; La colombie a annoncé en mai 2015 qu'elle cesserait d'utiliser du glyphosate dans ces programmes en octobre en raison de préoccupations au sujet de la toxicité humaine du produit chimique.en plus de son utilisation en tant qu'herbicide, le glyphosate est également utilisé pour la dessiccation des cultures (siccation) afin d'augmenter le rendement de récolte et, suite à la dessiccation, d'augmenter la concentration de saccharose dans la canne à sucre avant la récolte. l'application de glyphosate juste avant la récolte sur les céréales (comme le blé, l'orge et l'avoine) tue les cultures vivrières de sorte qu'elles sèchent plus rapidement et uniformément, de la même manière que les dessiccatifs. Cette culture sèche n'a pas besoin d'être andainée séché) avant la récolte, mais peut facilement être coupé directement et récolté. Cela permet aux agriculteurs de gagner du temps et de l'argent, ce qui est important dans les régions nordiques où la saison de croissance est courte. Les concentrations de résidus dans les haricots résultant d'une mauvaise application peuvent rendre la culture impropre à la vente.

En 2003, Monsanto a breveté l'utilisation du glyphosate comme antiparasitaire et, en 2017, ils ont commercialisé une formulation Roundup sans glyphosate comme herbicide pour pelouse.